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        說說大鼠心肌細胞H9C2的分離方法和質量檢測

        更新時間:2021-08-23 瀏覽次數:1473

          大鼠心肌細胞H9C2是原始克隆細胞系的亞克隆,該細胞系從胚胎BD1X大鼠心臟組織獲得,并顯示出骨骼肌的許多特性。這個細胞株中的成肌細胞能融合形成多核的肌管,并對乙酰膽堿的刺激發生反應。如果培養基中的血清濃度下降到1%,融合發生得很快。
          大鼠心肌細胞H9C2分離自心臟組織;心臟是脊椎動物身體中重要的一個器官,主要功能是為血液流動提供壓力,把血液運行至身體各個部分。心臟由心肌構成,左心房、左心室、右心房、右心室四個腔組成。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開,故互不相通,心房與心室之間有瓣膜(房室瓣),這些瓣膜使血液只能由心房流入心室,而不能倒流。心臟的作用是推動血液流動,向器官、組織提供充足的血流量,以供應氧和各種營養物質,并帶走代謝的終產物(如二氧化碳、無機鹽、尿素和尿酸等),使細胞維持正常的代謝和功能。心肌細胞呈菱形、多邊形等不規則形狀;細胞培養2h后開始貼壁,呈梭形;到12h左右,細胞開始伸出偽足,呈菱形、多角形;細胞分離培養48h以后,大部分伸出偽足、呈巴掌狀,部分心肌細胞會出現搏動;心肌細胞為終末分化細胞,在體外不增殖。體外培養的心肌細胞可保持結構及功能上的某些特點,并具有自發性節律搏動,且心肌細胞的培養具有簡便、定量、重復性好以及不受神經體液因素的影響等特點。利用培養的心肌細胞在探索非血液動力學因素所致的心肌肥厚的調節,研究心肌細胞的生物力學、凋亡、受體下調、缺血預處理、信號通路、對作用于心臟的新藥進行篩選并對其安全性進行評價以及從培養的心肌細胞中提取有價值的生物因子等方面具有廣闊的應用前景,對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
          普諾賽(Procell)實驗室分離的大鼠心肌細胞H9C2采用膠原酶-胰酶聯合消化法結合差速貼壁法,并用化學試劑抑制法篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。普諾賽(Procell)實驗室分離的大鼠心肌細胞經α-Sarcometricactin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

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